辽宁省行政事业单位国有资产管理办法
辽宁省人民政府
第261号
《辽宁省行政事业单位国有资产管理办法》业经2011年9月5日辽宁省第十一届人民政府第51次常务会议审议通过，现予公布，自2011年12月1日起施行。
省 长 陈政高
二○一一年九月二十三日
辽宁省行政事业单位国有资产管理办法
第一章 总 则
第一条 为加强行政事业单位国有资产管理，维护国有资产的安全和完整，合理配置和有效利用国有资产，保障和促进各项事业发展，根据国家有关规定，结合我省实际，制定本办法。
第二条 本办法适用于我省党的机关、人大机关、行政机关、政协机关、审判机关、检察机关、各民主党派机关（以下统称行政单位）和事业单位国有资产管理活动。
第三条 省、市、县（含县级市、区，下同）财政部门是本级政府负责行政单位和事业单位（以下统称行政事业单位）国有资产管理的职能部门，按照规定的职责权限，对行政事业单位国有资产实施综合管理。
行政事业单位对本单位占有、使用的国有资产实施具体管理。
事业单位的主管部门，按照规定的职责权限，对本部门所属事业单位的国有资产实施监督管理。
第四条 行政事业单位国有资产管理，应当遵循下列原则：
（一）资产管理与预算管理相结合；
（二）资产管理与财务管理相结合；
（三）实物管理与价值管理相结合。
第二章 资产配置
第五条 行政事业单位国有资产配置，应当符合规定的配置标准；对没有规定配置标准的，应当从实际需要出发，从严控制，合理配置。
财政部门对行政事业单位要求配置的资产，可以通过调剂、租赁解决的，不得重新购置。
财政部门会同有关部门根据国家有关规定、行政事业单位履行职能和本级政府财力状况等，定期制定和调整行政事业单位国有资产配置标准。
第六条 行政事业单位国有资产配置，除国家另有规定外，按照下列程序报批：
（一）行政事业单位应当在年度部门预算编制前，根据存量资产的质量、结构和分布情况，依照本级资产配置标准提出下一年度拟购置资产的品目、型号、主要性能指标和数量，测算经费额度，报本级财政部门审批；有主管部门的事业单位及实行垂直管理的行政单位报主管部门审核同意后，由行政事业单位主管部门（以下简称主管部门）报本级财政部门审批；
（二）财政部门根据本级资产配置原则、配置标准和行政事业单位资产存量状况进行审批；
（三）行政事业单位应当将批准的资产购置项目列入年度部门预算，并在上报年度部门预算时附送批复文件等相关材料，作为财政部门审批部门预算的依据；未经财政部门批准，行政事业单位不得将资产购置项目列入部门预算和单位经费支出。
行政事业单位因工作需要确需临时增加资产配置的，应当提出资产购置申请，报本级财政部门审批；有主管部门的事业单位及实行垂直管理的行政单位报主管部门审核同意后，由主管部门报本级财政部门审批。
第七条 经本级政府批准，由财政安排专项资金召开的重大会议、举办的大型活动等需要购置资产的，由会议或者活动主办单位提出申请，财政部门按照先调剂、后租赁、再购置的原则，按照本办法规定的程序进行审批。购置的资产，财政部门应当集中管理，实行领用制度。
第八条 行政事业单位用上级补助资金购置资产的，应当报本级财政部门备案。有主管部门的事业单位及实行垂直管理的行政单位应当报行政事业单位主管部门审批后，由行政事业单位主管部门报本级财政部门备案；上级补助资金项目明确有设备购置的，不再审批，由购置单位登记入账后报本级财政部门备案。
对上级直接配置、调拨、奖励的资产和接受捐赠的资产以及其他依法确认为国家所有的资产，行政事业单位应当及时入账，并在年终资产统计报告中披露。
第九条 行政事业单位购置纳入政府采购范围的资产，应当依法实施政府采购。
第十条 行政事业单位应当对配置的资产进行验收、登记，并及时进行账务处理。
第三章 资产使用
第十一条 行政事业单位应当建立健全国有资产使用管理制度，规范国有资产使用行为，发挥国有资产的使用效益，定期对占有、使用的国有资产进行清查盘点，做到账账、账卡、账实相符，防止国有资产流失。
事业单位应当加强对本单位专利权、商标权、著作权、土地使用权、非专利技术、商誉等无形资产的管理，防止无形资产流失。
第十二条 行政单位不得用国有资产对外担保，法律另有规定的除外。
行政单位拟将占有、使用的国有资产对外出租、出借的，应当报本级财政部门批准；实行垂直管理的行政单位，应当报主管部门审核同意后，由主管部门报本级财政部门批准。未经批准，不得对外出租、出借。
事业单位拟将占有、使用的国有资产对外投资、出租、出借和担保等，应当进行可行性论证后，报本级财政部门批准；有主管部门的事业单位，应当报主管部门审核同意后，由主管部门报本级财政部门批准。法律、行政法规另有规定的，从其规定。未经批准，不得对外投资、出租、出借或者担保等。
事业单位应当对本单位用于对外投资、出租和出借的资产实行专项管理，并在单位财务会计报告中对相关信息进行充分披露。
第十三条 行政单位申请国有资产对外出租、出借的，应当报送下列资料：
（一）国有资产产权登记证明；
（二）出租、出借国有资产的意向书；
（三）上一年度的财务决算；
（四）现有资产情况报告；
（五）其他依法需要提交的资料。
实行垂直管理的行政单位，还应当报送主管部门的批准文件。
第十四条 事业单位申请国有资产对外投资、出租、出借、担保等的，应当按照规定报送下列资料：
（一）国有资产产权登记证明；
（二）上一年度的财务决算；
（三）现有资产情况报告；
（四）可行性论证报告；
（五）其他依法需要提交的资料。
有主管部门的，还应当报送主管部门的批准文件。
事业单位对外出租、出借国有资产的，无需提供前款第四项资料。
利用国有资产出租、出借、担保等的，还应当报送相关意向书或者草签的合同。
第十五条 行政事业单位申请对外出租、出借国有资产的，财政部门应当自受理之日起7个工作日内作出是否批准的决定；不予批准的，应当书面说明理由。
事业单位申请利用国有资产对外投资的，财政部门应当自受理申请之日起15个工作日内作出是否批准的决定；不予批准的，应当书面说明理由。特殊情况需要延长的，经本部门负责人批准，可以延长10个工作日。
事业单位申请利用国有资产对外担保的，财政部门应当自受理之日起7个工作日内作出是否批准的决定；不予批准的，应当书面说明理由。
第十六条 经财政部门批准，行政事业单位将国有资产对外出租、出借的，应当与承租（借）人签订合同，并自合同签订之日起15个工作日内报财政部门备案。
第十七条 行政单位出租、出借国有资产的收益，按照政府非税收入管理的规定，实行“收支两条线”管理。
事业单位对外投资收益以及利用国有资产出租、出借和担保等取得的收入，应当纳入单位预算，统一核算，统一管理。国家和省另有规定的除外。
第十八条 行政事业单位超标准配置、低效运转或者长期闲置的国有资产，由本级财政部门调剂使用或者处置；有主管部门的事业单位及实行垂直管理的行政单位，由主管部门在系统内调剂使用，报本级财政部门备案。
第四章 资产处置
第十九条 行政事业单位国有资产处置，是指行政事业单位国有资产产权的转移及核销，包括国有资产的无偿转让、出售、置换、报损、报废以及货币性资产损失核销等。
行政事业单位国有资产处置范围包括：
（一）闲置资产；
（二）因技术原因并经过科学论证，确需报废、淘汰的资产；
（三）因单位分立、撤销、合并、改制、隶属关系改变等原因发生的产权或者使用权转移的资产；
（四）盘亏、呆账及非正常损失的资产；
（五）已超过使用年限无法使用的资产；
（六）因召开重大会议、举办大型活动等临时购置的资产；
（七）依照国家有关规定需要进行资产处置的其他情形。
第二十条 行政事业单位处置国有资产，应当履行审批手续，未经批准不得自行处置。
行政单位国有资产处置的审批权限，除国家另有规定外，由省财政部门根据本办法作出规定。
事业单位国有资产处置由事业单位提出意见，经有关技术部门鉴定后，按照下列权限审批：
（一）事业单位占有、使用的土地、房屋建筑物和车辆等资产的处置，货币性资产损失的核销以及单位价值或者批量价值在规定限额以上的资产的处置，经主管部门审核后报本级财政部门审批；
（二）规定限额以下的资产的处置报主管部门审批，主管部门将审批结果定期报本级财政部门备案。
法律、行政法规另有规定的，从其规定。处置限额由省财政部门另行制定。
第二十一条 行政事业单位处置国有资产，应当遵循公开、公平、公正的原则，依法采取招标投标、拍卖、协议转让等方式处置。具体办法由省财政部门会同省有关部门另行制定。
行政事业单位处置国有资产的价格，不得低于经核准或者备案的资产评估结果。当处置价格低于经核准或者备案的资产评估结果时，应当暂停处置，在报经本级财政部门批准后方可处置。法律、法规另有规定的，从其规定。
第二十二条 行政事业单位分立、合并、撤销、改制及隶属关系发生改变时，应当对其占有、使用的国有资产进行清查登记，编制清册，报本级财政部门审核、处置，并及时办理资产转移手续。
行政单位联合召开重大会议、举办大型活动等而临时购置的国有资产，由主办单位在会议、活动结束时按照本办法规定报批后处置。
第二十三条 行政事业单位国有资产处置收入，按照政府非税收入管理规定，缴入财政专户或者国库，实行“收支两条线”管理。
第五章 资产评估与资产清查
第二十四条 有下列情形之一的，行政事业单位应当委托具有资产评估资质的资产评估机构对有关资产进行评估：
（一）取得没有原始价格凭证资产的；
（二）拍卖、有偿转让、置换国有资产的；
（三）整体或者部分改制为企业的；
（四）合并、分立、清算的；
（五）整体或者部分资产租赁给非国有单位的；
（六）确定涉讼资产价值的；
（七）以非货币性资产对外投资的；
（八）依照国家有关规定需要进行资产评估的其他情形。
第二十五条 行政事业单位国有资产评估项目实行核准制和备案制。实行核准制或者备案制的具体办法，按照国务院财政部门和省财政部门的有关规定执行。
第二十六条 行政事业单位有下列情形之一的，应当按照有关规定进行资产清查：
（一）国家专项工作要求或者本级政府组织资产清查的；
（二）进行重大改革或者整体、部分改制为企业的；
（三）遭受重大自然灾害等不可抗力造成资产严重损失的；
（四）会计信息严重失真或者国有资产出现重大流失的；
（五）会计政策发生重大更改，涉及资产核算方法发生重要变化的；
（六）本级财政部门认为应当进行资产清查的其他情形。
第二十七条 行政事业单位资产清查工作应当包括下列主要内容：
（一）基本情况清理；
（二）账务清理；
（三）财产清查、损益认定；
（四）资产核实和完善制度等。
资产清查的具体办法按照国务院财政部门和省财政部门的有关规定执行。
第六章 产权登记与产权纠纷调处
第二十八条 行政事业单位应当向本级财政部门申请产权登记，并由财政部门核发国有资产产权登记证。
行政事业单位国有资产产权登记的内容主要包括：
（一）单位名称、住所、负责人及成立时间；
（二）单位性质、主管部门；
（三）单位资产总额、国有资产总额、主要实物资产额及其使用状况；
（四）行政事业单位对外出租、出借资产情况，事业单位对外投资、担保情况；
（五）需要登记的其他事项。
第二十九条 行政事业单位发生分立、合并、部分改制，以及隶属关系、单位名称、住所和单位负责人等产权登记内容发生变化的，应当办理产权变更登记；因依法撤销或者整体改制等原因被清算、注销的，应当办理产权注销登记。
第三十条 行政单位之间的产权纠纷，由当事人协商解决。协商不能解决的，由财政部门或者本级政府调解、裁定。
行政单位与非行政单位、组织或者个人之间发生产权纠纷，由行政单位提出处理意见，报经财政部门同意后，与对方当事人协商解决。协商不能解决的，依照司法程序处理。
事业单位与其他国有单位之间发生国有资产产权纠纷的，由当事人协商解决。协商不能解决的，可以向本级或者共同上一级财政部门申请调解或者裁定，必要时报有管辖权的政府处理。
事业单位与非国有单位或者个人之间发生产权纠纷的，事业单位应当提出拟处理意见，经主管部门审核并报同级财政部门批准后，与对方当事人协商解决。协商不能解决的，依照司法程序处理。
第七章 监督检查
第三十一条 财政部门、主管部门、行政事业单位及其工作人员，应当履行国有资产监督管理职责，依法维护国有资产的安全完整，提高国有资产使用效益。
财政部门、主管部门和行政事业单位，应当建立健全科学合理的国有资产监督管理责任制，将国有资产监督管理的责任落实到具体部门、单位和个人。
行政事业单位国有资产监督应当坚持单位内部监督与财政监督、审计监督、社会监督相结合，事前监督与事中监督、事后监督相结合，日常监督与专项检查相结合。
第三十二条 财政部门、主管部门和行政事业单位，应当按照国有资产管理信息化的要求，建立和完善国有资产管理信息系统，对国有资产实行动态管理。
财政部门应当对行政单位资产统计报告进行审核批复。经财政部门审核批复的统计报告，应当作为预算管理和资产管理的依据和基础。财政部门与行政单位应当对国有资产实行绩效管理，监督资产使用的有效性。
事业单位国有资产占有、使用状况，是主管部门、财政部门编制和安排事业单位预算的重要参考依据。财政部门、主管部门应当建立和完善资产与预算有效结合的激励和约束机制。
第三十三条 财政部门、主管部门和行政事业单位，应当建立国有资产管理档案，对国家规定的应当立卷归档的材料，按照规定定期向本单位档案机构或者档案工作人员移交，集中管理，任何个人不得据为己有。
财政部门、主管部门和行政事业单位，应当按照国家有关规定，定期向档案馆移交档案。
第三十四条 财政部门、主管部门和行政事业单位，应当建立举报制度，公开举报电话号码、通信地址或者电子邮件信箱等。
任何单位和个人有权对违反本办法规定的行为进行举报，财政部门、主管部门和行政事业单位收到举报后，应当依法及时处理。
第八章 法律责任
第三十五条 行政事业单位及其工作人员违反本办法规定，有下列行为之一的，由财政部门责令改正，并依据国务院《财政违法行为处罚处分条例》的规定予以处理：
（一）以虚报、冒领等手段骗取财政资金的；
（二）擅自占有、使用和处置国有资产的；
（三）擅自提供但保的；
（四）未按规定缴纳国有资产收益的。
第三十六条 主管部门及其工作人员在上缴、管理国有资产收益或者下拨财政资金时，违反本办法规定的，依据国务院《财政违法行为处罚处分条例》的规定予以处理；构成犯罪的，依法追究刑事责任。
主管部门在配置事业单位国有资产或者审核、批准国有资产使用、处置事项的工作中，违反本办法规定的，由财政部门责令其限期改正；逾期不改正的，予以警告。
第三十七条 财政部门及其工作人员违反本办法规定，有下列行为之一的，对主要负责人和直接责任人员，由监察机关或者任免机关依照人事管理权限依法给予行政处分；构成犯罪的，依法追究刑事责任：
（一）利用职务之便谋取不正当利益的；
（二）不依法履行法定职责的；
（三）发现违法行为不予查处的；
（四）有其他滥用职权、徇私舞弊、玩忽职守行为的。
第三十八条 违反本办法的其他行为，按照有关法律、法规和规章的规定予以处罚。
第九章 附 则
第三十九条 社会团体和民办非企业单位占有、使用国有资产的，参照本办法执行。
实行企业化管理并执行企业财务会计制度的事业单位，以及事业单位创办的具有法人资格的企业，按照企业国有资产监督管理的有关规定实施监督管理。
境外行政事业单位、人民防空等国有资产管理，按照国家有关规定执行。
省政府行政事业单位国有资产的产权界定、登记和处置工作，按照省有关规定执行。
第四十条 本办法自2011年12月1日起施行。
药品卫生检验方法
卫生部
药品卫生检验方法
卫生部
第一章 药品卫生检验通则
一、供试品取样及注意事项
1．供试品取样应有一定数量，以使检验结果具有代表性。因此，正常的供试品，一般每批应随机抽取两瓶或两盒以上的包装单位。检验时，每次最少应分取两瓶（盒）以上的样品共10克或10毫升，中药蜜丸至少应分取4丸以上共10克；贵重或微量包装的供试品，取样量可酌减
。
2．凡异常的供试品，则选取有疑问的样品进行检验。
肉眼能看出发霉生虫变质、活螨的样品，应判为不合格，无需再作抽样检验。
3．检查活螨的样品抽样量，见活螨的检验法。
4．供试品在检验前，应严格保持包装的原有状态，不得启开，防止再污染。并放在阴凉干燥处，防止微生物再繁殖，以免影响检验结果。凡已将原包装启开，则无代表性，应另行取样。
5．供试品在检验过程中，从开封至全部检验操作结束，须防止微生物再污染和扩散。凡直接与样品接触的用具，均应事先灭菌并保持无菌；全部操作须在无菌室内进行，或在相应的条件下，按无菌操作规定进行。
6．供试品稀释后，须在1—2小时内操作完毕，防止微生物繁殖或死亡。
7．供试品稀释成供试液后，应在均匀状态下取样。凡因抑菌或不溶于水的剂型，其供试品应作特殊处理后进行检验。
8．从供试品检出大肠杆菌或其它致病菌的报告发出起，该菌种保存一个月备查。如有疑问，可送药检部门或上一级药检单位复核。
二、供试品制备
1．凡固体样品，应称取10克，加在100毫升稀释剂（生理盐水或磷酸盐缓冲液）中，经充分研磨或振摇制成供试液。液体样品，则可量取10毫升加在90毫升稀释剂中，混匀后成供试液。
2．凡含有防腐剂或抑菌成份且影响检验的供试品，可经离心沉淀集菌法及其他适宜的方法处理后，检验大肠杆菌和其他致病菌。集菌处理法如下：
取供试液10毫升，以无菌手续放在灭菌的尖底刻度离心管中，经每分钟3500转以上离心沉淀30分钟，用灭菌毛细吸管吸取上清液弃掉，并留下管底的2毫升残余液，将其全部洗净加在培养基中，进行增菌检验。含有不溶性药渣的样品稀释液，可均匀吸取10毫升放在离心管中
，先经每分钟500转左右离心沉淀5分钟，取其上清液放在另一灭菌尖底刻度离心管中，再经每分钟约3500转以上离心沉淀30分钟，轻轻吸取上清液弃掉，取其管底的2毫升残余液全部洗净加在培养基中，增菌检验即得。
3．非水溶性的软膏、乳膏、油膏剂等，可称取样品5克，放在乳钵或烧杯中，加8毫升灭菌的吐温—80充分研磨匀后，加入经140°干热灭菌半小时的西黄蓍胶2．5克研磨匀。再加少量45°的稀释剂充分研磨，使呈均匀乳剂。随后边加入稀释剂边研磨，使成100毫升乳剂
，移至三角瓶中，即为1∶20供试液。
或称取供试品2．5克，分别量取液体石蜡10毫升，吐温—80．10毫升，稀释剂30毫升。先将供试品置乳钵中，边研磨边滴加液体石蜡；然后再边研磨边滴加吐温—80，研磨均匀后；再边加入稀释剂边研磨，开始每次约1毫升，待起团块时，加入稀释剂3毫升，稍停一分钟
，再轻轻研磨至乳化，将稀释剂加完为止，即得1∶20供试液。
4．滤膜法：取规定量的供试品，按1毫升加入灭菌生理盐水50毫升左右，摇匀，用灭菌吸管或注射器注入薄膜过滤器内，减压抽干后，用灭菌生理盐水或其他适宜的溶剂冲洗薄膜3次，每次50毫升。取出薄膜，剪成几条，加至10毫升灭菌稀释剂中，充分摇动，使成供试液。可
供细菌、酵母菌和霉菌计数用。或将剪成几条的上述薄膜加至有关的增菌培养基中培养，可供检查绿脓杆菌或金黄色葡萄球菌用。
三、阳性菌株对照试验
1．为便于研究观察成药制剂中，某些含有防腐剂和抑菌成份的干扰作用，以及测试常规检验方法和培养基、试剂等的灵敏度时，可将定量的已知阳性对照菌加在供试品稀释液中，按检验供试品的操作方法进行阳性菌的对照试验。阳性对照菌应生长。
2．常用的阳性对照菌株，卫生部检定所编号：大肠杆菌44102、沙门氏菌50094、绿脓杆菌10104、金黄色葡萄球菌26003和破伤风杆菌64067等。
3．对照试验加入的已知活菌量，每批供试品应控制在50—100个范围之内，需氧菌常用的计数方法，如金黄色葡萄球菌可用37℃培养18—20小时
－6
新鲜肉汤培养物，十倍递增稀释至10 ，取其0．1
－7
毫升按琼脂平板表面涂抹法或取10 稀释液1毫升按浇碟法进行活菌数测定。按每毫升菌液内所含的活菌量，取适量加在供试品里，对照检验即得。破伤风杆菌的阳性对照以作毒力试验为主（具体操作见破伤风杆菌检验项下。）
4．作阳性菌株对照试验时，应注意安全，严格防止对照菌污染供试品和环境。为此，加入阳性菌的操作可在另外无菌室或其他适宜的地方进行。
第二章 药品卫生检验法
一、细菌总数测定法
细菌总数的测定，是考察供试品每克或每毫升内所污染的活菌数量。测定结果便于判明供试品被细菌污染的程度，以及生产单位所用的药品原料、工具设备和工艺流程、操作者的卫生状况，是对供试品进行卫生学总评价的综合依据。
1．供试品的测定：
固体供试品，以无菌操作称取若干克，按下列方法之一进行稀释：
（1）将已称取供试品置入灭菌乳钵中加入适量稀释剂，充分研磨，然后移至于灭菌三角瓶中，共加入稀释剂100毫升，使成1∶10均匀供试液。
（2）将已称取的供试品连同100毫升的稀释剂加入灭菌三角瓶或其他相应容器内，进行振荡，使成1∶10的均匀供试液。
液体供试品，可量取10毫升加入90毫升稀释剂，混匀即得。
用1毫升灭菌吸管，吸取1∶10供试液1毫升，沿管壁注入装有9毫升灭菌的稀释剂试管内，混匀即为1∶100稀释液。
另取1毫升灭菌吸管，按上项操作顺序作10倍递增稀释。如此每递增稀释一次，应换用1支1
－3
毫升灭菌吸管并充分混匀，稀释至10 或适当倍数备检。
另用1毫升灭菌吸管1支，按高倍稀释至低倍稀释的顺序分别吸取各稀释度的液体1毫升，注入直径9厘米的平皿内，或在作上述10倍递增稀释时，应稀释妥一稀释度，即可取1毫升稀释液注入平皿内。一般可根据对供试品污染情况的估计，从供试液起选择2—3个适宜稀释度进行
测定，每个稀释度各用2—3个平皿。
稀释液注入平皿后，应及时将熔化并冷至45—50℃的肉汤琼脂培养基倾注平皿内，各约15毫升，随即转动平皿使充分混合均匀。待琼脂凝固后，翻转平板，置37℃培养箱内培养至24小时和48小时，并分别计算平板内生长的的菌落。一般以48小时的菌落数为准。
为减少片状菌落的干扰，也可采用0．001％ＴＴＣ琼脂，在无菌室开盖倒置或换灭菌的干燥陶瓦盖等方法使平板表面干燥后，再进行培养。
2．菌落计数方法：
先用肉眼观察，点数菌落数（霉菌不包括在内），然后持5—10倍放大镜检查有无遗漏。各平板菌落计数后，求出同一稀释度各平板生长的平均菌落数。如平板中有连成片状的菌落或花点样菌落蔓延生长时，该平板不宜计数。
3、细菌菌数报告：
一般的报告方法是选取同一稀释度平均菌落数在30—300之间的平板，作为菌落总数测定的范围。如每个稀释度使用两个平板，应采用两个平板的菌落平均数。其中一个平板有较大片状菌落生长时，或两平板菌落数相差一倍以上，此稀释度不宜采用。如每个稀释度使用三个平板，
应采用三个平板菌落数的平均数，其中有两个平板菌落数较接近，另一个平板相差在一倍以上，或有片状菌落生长时，则应采用前者平均数为该稀释度的菌落数，按下列规则乘其稀释倍数报告之。
稀释度的选择：
（1）若只有一个稀释度，平均菌落数在30—300个之间时，乘以稀释倍数报告之（见表1例1）。
（2）若两个稀释度，其平均菌落数均在30—300个之间，则应求出两者总菌数之比，凡比值小于或等于2应报告其平均数，若大于2则报告其中较小的数字。（见表1例2、3）。
（3）若所有稀释度的平均菌落数均多于300个，则应按稀释度最高的平均菌落数，乘以稀释倍数报告之（见表1例4）。
（4）若所有稀释度的平均菌落数均少于30个，则应按稀释倍数最低的平均菌落数，乘以稀释倍数报告之（见表1例5）。
（5）若所有稀释度的平均菌落数均不在30—300之间，其中一个稀释度大于300，而相邻的另一稀释度小于30时，则以接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见表1例6）。
（6）若所有稀释度均无菌生长，报告数为＜10个／克或毫升。
菌数的报告，菌数在100以内时，按实有数报告之，大于100时，采用左端前二位数字，在前两位数字之后的数值，应以四舍五入法计算。为了缩短数字后面零的个数，可用10的指数来表示（见表1）。
如供试品经检验，细菌数不合格，需复验时，应重新取样，依法复试两次，细菌数仍有一次不合格时，则该供试品细菌数应判为不合格。
表1 细菌计数结果及报告方法
－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－
＼ 平均菌｜ 供试品稀释倍数 ｜两 数｜ 菌落 ｜
＼ 落数 ｜－－－－－－－－－－－－－－｜稀 ｜ 总数 ｜ 细菌总数报告方式
＼ ｜ －1｜ －2｜ －3｜释 之｜ （个／ ｜ （个／克或毫升）
例 ＼ ｜10 ｜10 ｜10 ｜度 ｜ 克或 ｜
次 ＼｜ ｜ ｜ ｜菌 比｜ 亳升） ｜
－－－－－｜－－－－｜－－－－｜－－－－｜－－－｜－－－－－－｜－－－－－－－－－－－－－－－－
｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ 4
1 ｜1365｜ 164｜ 20 ｜ — ｜ 16400｜ 16000｜或1．6×10
－－－－－｜－－－－｜－－－－｜－－－－｜－－－｜－－－－－－｜－－－－－－｜－－－－－－－－－
｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ 4
2 ｜2760｜ 295｜ 46 ｜1．6｜ 37750｜ 38000｜或3．8×10
－－－－－｜－－－－｜－－－－｜－－－－｜－－－｜－－－－－－｜－－－－－－｜－－－－－－－－－
｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ 4
3 ｜2890｜ 271｜ 60 ｜2．2｜ 27100｜ 27000｜或2．7×10
－－－－－｜－－－－｜－－－－｜－－－－｜－－－｜－－－－－－｜－－－－－－｜－－－－－－－－－
｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ 5
4 ｜不可计 ｜4650｜ 513｜ — ｜513000｜510000｜或5．1×10
－－－－－｜－－－－｜－－－－｜－－－－｜－－－｜－－－－－－｜－－－－－－｜－－－－－－－－－
｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ 2
5 ｜ 27 ｜ 11 ｜ 5 ｜ — ｜ 270 ｜ 270 ｜或2．7×10
－－－－－｜－－－－｜－－－－｜－－－－｜－－－｜－－－－－－｜－－－－－－｜－－－－－－－－－
｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ 4
6 ｜不可计 ｜ 305｜ 12 ｜ — ｜ 30500｜ 31000｜或3．1×10
－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－
二、霉菌总数测定法
霉菌总数（包括酵母菌）的测定，是考察供试品每克或每毫升内所污染活的酵母菌、霉菌数量，借以判明供试品的酵母菌、霉菌污染程度及其一般卫生状况。
1．供试品的测定：
供试液与稀释按细菌总数测定项下规定的方法进行。取供试液、1∶100和1∶1000的稀释液各1毫升分别注入平皿内，每个稀释度各用2—3个平皿，加入稀释液后将熔化并冷至45—50°的虎红琼脂培养基约15毫升倾入平皿内，充分摇匀。凝固后，翻转平板置25—2
8°培养72小时，计算平板内生长的霉菌菌落数。若有根霉或毛霉蔓延生长，为避免影响其它霉菌的计数时，应及时将此平板取出计数。
2．酵母菌霉菌菌数报告：
酵母菌、霉菌计数，应选取带有菌丝体的菌落和酵母菌菌落进行点数。先点清每个平板上生长的菌落数，再求出每一稀释度的平均菌落数。判定结果时，应选取平板上菌落数既清楚可数，平均又在5—50个范围以内的菌落数，乘以稀释倍数后，做为供试品的霉菌总数报告之。若有两
个稀释度的菌落数皆在5—50个以内或三个稀释度皆不在此范围之内时，应参照细菌总数测定的规则报告之。
一般眼科制剂的细菌、霉菌总数测定按上述方法进行并报告之。如抗生素或有抑菌作用的制剂，采用适宜的方法处理后，按常规方法进行。
如供试品经检验，霉菌总数不合格，需复检时，应重新取样，依法复试两次。霉菌数仍有一次不合格时，供试品应判为酵母菌、霉菌数不合格。
三、大肠杆菌检验法
大肠杆菌来源于人和温血动物的粪便。凡由供试品中检出大肠杆菌时，表明该药品已被粪便污染，患者服用后，有被粪便中可能存在的其它肠道致病菌和寄生虫卵等病源体感染的危险。因此，大肠杆菌被列为重要的卫生指标菌，是非规定灭菌口服药品的常规必检项目之一。
大肠杆菌检验程序。
表2 肠杆菌科各菌属的生化特性鉴别表
－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－
｜ ｜ ｜爱 ｜ ｜亚 ｜枸 ｜克 ｜ 肠 杆 菌 属 ｜ 沙 雷 氏 菌 属 ｜
菌属 ｜艾 ｜志 ｜德 ｜沙 ｜利 ｜橼 ｜雷 ｜－－－－－－－－－－－－｜－－－－－－－－－－－－｜
｜希 ｜贺 ｜华 ｜门 ｜桑 ｜酸 ｜伯 ｜ ｜ ｜ 哈夫尼亚 ｜ ｜ ｜ 液化 ｜
－－－－－－｜氏 ｜氏 ｜氏 ｜氏 ｜那 ｜杆 ｜氏 ｜阴沟｜产气｜－－－－－－｜粘 质｜红色｜－－－－－｜
生化特性 ｜菌 ｜菌 ｜菌 ｜菌 ｜菌 ｜菌 ｜菌 ｜ ｜ ｜37℃｜22- ｜ ｜ ｜37℃｜22- ｜
｜属 ｜属 ｜属 ｜属 ｜属 ｜属 ｜属 ｜ ｜ ｜ ｜25℃ ｜ ｜ ｜ ｜25℃｜
－－－－－－｜－－｜－－｜－－｜－－｜－－｜－－｜－－｜－－｜－－｜－－｜－－－｜－－－｜－－｜－－｜－－｜
｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
靛基质 ｜+ ｜-/+ ｜+ ｜- ｜- ｜- ｜-/+ ｜- ｜- ｜- ｜- ｜- ｜- ｜- ｜- ｜
｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
甲基红 ｜+ ｜+ ｜+ ｜+ ｜+ ｜+ ｜- ｜- ｜- ｜+/- ｜- ｜-/+ ｜-/+ ｜+/- ｜-/+ ｜
｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
Ｖ－Ｐ反应 ｜- ｜- ｜- ｜- ｜- ｜- ｜+ ｜+ ｜+ ｜+/- ｜+ ｜+ ｜+ ｜-/+ ｜+/- ｜
｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
西蒙氏枸橼 ｜- ｜- ｜- ｜d ｜+ ｜+ ｜+ ｜+ ｜+ ｜(+) ｜d ｜+ ｜+ ｜+ ｜+ ｜
酸盐 ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜/- ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
－－－－－－｜－－｜－－｜－－｜－－｜－－｜－－｜－－｜－－｜－－｜－－｜－－－｜－－－｜－－｜－－｜－－｜
硫化氢（三糖｜- ｜- ｜+ ｜+ ｜+ ｜+/- ｜- ｜- ｜- ｜- ｜- ｜- ｜- ｜- ｜- ｜
铁） ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ w ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ w ｜-, ｜ ｜ ｜
尿素酶 ｜- ｜- ｜- ｜- ｜- ｜d ｜+ ｜+/- ｜- ｜- ｜- ｜d ｜+)w ｜d ｜ ｜
｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
氰化钾 ｜- ｜- ｜- ｜- ｜- ｜+ ｜+ ｜+ ｜+ ｜+ ｜+ ｜+ ｜-/+ ｜+ ｜ ｜
｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
动力 ｜+/- ｜- ｜+ ｜+ ｜+ ｜+ ｜- ｜+ ｜+ ｜+ ｜+ ｜+ ｜+ ｜+ ｜+ ｜
｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
明胶(22℃)｜- ｜- ｜- ｜- ｜(+) ｜- ｜- ｜(+) ｜-/ ｜ ｜- ｜+/ ｜+ ｜ ｜+ ｜
｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜/- ｜(+) ｜ ｜ ｜(+) ｜ ｜ ｜ ｜
－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－
－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－
赖氨酸脱羧 ｜d ｜- ｜+ ｜+ ｜+ ｜- ｜+ ｜- ｜+ ｜+ ｜+ ｜+ ｜+/ ｜+/- ｜+ ｜
酶 ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜(+) ｜ ｜ ｜
｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
精氨酸双水 ｜d ｜-/ ｜- ｜(+) ｜+/ ｜d ｜- ｜+ ｜- ｜- ｜- ｜- ｜- ｜- ｜- ｜
解酶 ｜ ｜(+) ｜ ｜/+ ｜(+) ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
鸟氨酸脱羧 ｜d ｜d ｜+ ｜+ ｜+ ｜d ｜- ｜+ ｜+ ｜+ ｜+ ｜+ ｜- ｜+ ｜+ ｜
酶 ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
苯丙氨酸脱 ｜- ｜- ｜- ｜- ｜- ｜- ｜- ｜- ｜- ｜- ｜- ｜- ｜- ｜- ｜ ｜
氨酶 ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
丙二酸钠 ｜- ｜- ｜- ｜- ｜+ ｜d ｜+ ｜+/- ｜+/- ｜+/- ｜d ｜- ｜+/- ｜- ｜ ｜
－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－
－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－
葡萄糖产气 ｜+ ｜- ｜+ ｜+ ｜+ ｜+ ｜+ ｜+ ｜+ ｜+ ｜+ ｜+°/- ｜-/+ ｜+ ｜ ｜
｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
乳糖 ｜+ ｜- ｜- ｜- ｜d ｜(+) ｜+ ｜+ ｜+ ｜-/ ｜- ｜- ｜+ ｜d ｜(+) ｜
｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜/+ ｜ ｜ ｜ ｜(+) ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
蔗糖 ｜d ｜- ｜- ｜- ｜- ｜d ｜+ ｜+ ｜+ ｜d ｜-/(+) ｜+ ｜+ ｜+ ｜ ｜
｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
甘露醇 ｜+ ｜+/- ｜- ｜+ ｜+ ｜+ ｜+ ｜+ ｜+ ｜+ ｜+ ｜+ ｜+ ｜+ ｜+ ｜
－－－－－－｜－－｜－－｜－－｜－－｜－－｜－－｜－－｜－－｜－－｜－－｜－－－｜－－－｜－－｜－－｜－－｜
卫矛醇 ｜d ｜d ｜- ｜d ｜- ｜d ｜-/+ ｜-/+ ｜- ｜- ｜- ｜- ｜- ｜- ｜ ｜
｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
水杨甙 ｜d ｜- ｜- ｜- ｜- ｜d ｜+ ｜+/ ｜+ ｜d ｜d ｜+ ｜+ ｜+ ｜ ｜
｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜(+) ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
侧金盏花醇 ｜- ｜- ｜- ｜- ｜- ｜- ｜+/- ｜-/+ ｜+ ｜- ｜- ｜d ｜+ ｜d ｜ ｜
｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
肌醇 ｜- ｜- ｜- ｜d ｜- ｜- ｜+ ｜d ｜+ ｜- ｜- ｜d ｜d ｜+ ｜+ ｜
－－－－－－｜－－｜－－｜－－｜－－｜－－｜－－｜－－｜－－｜－－｜－－｜－－－｜－－－｜－－｜－－｜－－｜
山梨醇 ｜+ ｜d ｜- ｜+ ｜+ ｜+ ｜+ ｜+ ｜+ ｜- ｜- ｜+ ｜- ｜+ ｜ ｜
｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
阿拉伯糖 ｜+ ｜d ｜- ｜+/ ｜+ ｜+ ｜+ ｜+ ｜+ ｜+ ｜+ ｜- ｜+ ｜+ ｜+ ｜
｜ ｜ ｜ ｜(+) ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
棉子糖 ｜d ｜d ｜- ｜- ｜- ｜d ｜+ ｜+ ｜+ ｜- ｜- ｜- ｜+ ｜d ｜+ ｜
｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
鼠李糖 ｜d ｜d ｜- ｜+ ｜+ ｜+ ｜+ ｜+ ｜+ ｜+ ｜+ ｜- ｜- ｜- ｜- ｜
－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－
－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－
｜ 果胶杆菌属｜ 形 杆 菌 属 ｜普罗菲登斯菌属
菌属 ｜－－－－－－｜－－－－－－－－－－－－－－｜－－－－－－－
－－－－－－｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
生化特性 ｜37℃｜22- ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
｜ ｜25℃ ｜普 通｜奇异｜摩根氏｜雷极氏｜产碱｜司徒氏
－－－－－－｜－－｜－－－｜－－－｜－－｜－－－｜－－－｜－－｜－－－－
｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
靛基质 ｜-/+ ｜-/+ ｜+ ｜- ｜+ ｜+ ｜+ ｜+
｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
甲基红 ｜-/+ ｜+/- ｜+ ｜+ ｜+ ｜+ ｜+ ｜+
｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
Ｖ－Ｐ反应 ｜-/+ ｜-/+ ｜- ｜-/+ ｜- ｜- ｜- ｜-
｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
西蒙氏枸橼 ｜d ｜+/(+) ｜d ｜+/ ｜- ｜+ ｜+ ｜+
酸盐 ｜ ｜ ｜ ｜(+) ｜ ｜ ｜ ｜
－－－－－－｜－－｜－－－｜－－－｜－－｜－－－｜－－－｜－－｜－－－－
硫化氢（三糖｜- ｜- ｜+ ｜+ ｜- ｜- ｜- ｜-
铁） ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
｜ ｜ w ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
尿素酶 ｜d ｜d ｜+ ｜+/ ｜+ ｜+ ｜- ｜-
｜ ｜ ｜ ｜(+) ｜ ｜ ｜ ｜
｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
氯化钾 ｜+/- ｜+/- ｜+ ｜+ ｜+ ｜+ ｜+ ｜+
｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
动力 ｜+/- ｜+/- ｜+ ｜+ ｜+/- ｜+ ｜+ ｜+/-
｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
明胶(22℃)｜ ｜+/(+) ｜+ ｜+ ｜- ｜- ｜- ｜-
｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
－－－－－－｜－－｜－－－｜－－－｜－－｜－－－｜－－－｜－－｜－－－－
赖氨酸脱羧 ｜- ｜- ｜- ｜- ｜- ｜- ｜- ｜-
酶 ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
精氨酸双水 ｜- ｜-/(+) ｜- ｜- ｜- ｜- ｜- ｜-
解酶 ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
鸟氨酸脱羧 ｜- ｜- ｜- ｜+ ｜+ ｜- ｜- ｜-
酶 ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
苯丙氨酸脱 ｜- ｜- ｜+ ｜+ ｜+ ｜+ ｜+ ｜+
氨酶 ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
丙二酸钠 ｜-/+ ｜-/+ ｜- ｜- ｜- ｜- ｜- ｜-
－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－
－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－
葡萄糖产气 ｜-/+ ｜d ｜+°/- ｜+ ｜d ｜-/+ ｜d ｜-
｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
乳糖 ｜d ｜+/(+) ｜- ｜- ｜- ｜- ｜- ｜-
｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
蔗糖 ｜+/- ｜+ ｜+ ｜d ｜- ｜d ｜d ｜(+)
｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜/+
｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
甘露醇 ｜+/- ｜+ ｜- ｜- ｜- ｜+/- ｜- ｜d
－－－－－－｜－－｜－－－｜－－－｜－－｜－－－｜－－－｜－－｜－－－－
卫矛醇 ｜- ｜- ｜- ｜- ｜- ｜- ｜- ｜-
｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
水杨甙 ｜d ｜+ ｜d ｜d ｜- ｜d ｜- ｜-
｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
侧金盏花醇 ｜- ｜- ｜- ｜- ｜- ｜d ｜+ ｜-
｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
肌醇 ｜d ｜- ｜- ｜- ｜- ｜+ ｜- ｜+
－－－－－－｜－－｜－－－｜－－－｜－－｜－－－｜－－－｜－－｜－－－－
山梨醇 ｜- ｜- ｜- ｜- ｜- ｜d ｜- ｜d
｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
阿拉伯糖 ｜d ｜+ ｜- ｜- ｜- ｜- ｜- ｜-
｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
棉子糖 ｜d ｜+/(+) ｜- ｜- ｜- ｜- ｜- ｜-
｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
鼠李糖 ｜d ｜d ｜- ｜- ｜- ｜+/- ｜- ｜-
－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－
注：＋90％以上阳性；－90％以上阴性；（＋）迟缓阳性；ｄ有不同生化型；“微弱阳性；＋°微产气；＋／（＋）多数阳性，少
数迟缓阳性；（＋）／＋多数迟缓阳性，少数阳性；＋／－多数阳性，少数阴性；－／＋多数阴性，少数阳性；－／（＋）多数阴
性，少数迟缓阳性；（＋）／－多数迟缓阳性，少数阴性；＋°／－多数阳性微产气，少数阴性。
大肠杆菌检验程序图解
－－－－－
｜供试品｜
－－－－－
↓稀释
－－－－－
｜供试液｜
－－－－－
↓
－－－－－－－－
｜胆盐乳糖增菌｜
－－－－－－－－
37°↓18—24小时
－－－－－－－－－－－－
｜ＭａｃＣ平板或ＥＭＢ｜
－－－－－－－－－－－－
37°↓18—24小时
－－－－－
｜纯培养｜
－－－－－
37°↓18－24小时
－－－－－－－
｜染色、镜检｜
－－－－－－－
↓
－－－－－－－－－－－－－－－
↓ ↓
－－－－－－－－－ －－－－－－
｜ＩＭＶｉＣ试验｜ ｜乳糖发酵｜
－－－－－－－－－ －－－－－－
｜ ｜
－－－－－－－－－－－－－－－
↓
－－－－－
｜报 告｜
－－－－－
（一）增菌培养：
取供试液10毫升，接种于备妥的100毫升胆盐乳糖增菌液内。置37°培养18—24小时，进行增菌。
（二）分离培养：
将上述增菌培养物，划线接种于麦康凯琼脂（ＭａｃＣ）或伊红美兰（ＥＭＢ）琼脂平板上，置37°培养18—24小时，检查有无疑似大肠杆菌菌落。大肠杆菌在麦康凯平板上的典型菌落呈鲜艳的桃红、粉红色；在伊红美兰平板上的典型菌落呈紫黑色，圆形，边缘整齐，表面光滑
湿润，常有金属光泽。由于药物影响，亦呈现紫色、粉紫、中心灰紫、无黑心、湿润等，常为大肠杆菌，均应注意挑选。
（三）纯培养：
至少挑选2—3个疑似大肠杆菌菌落，分别接种于肉汤琼脂斜面或三糖（双糖）铁琼脂斜面，置37°培养18—24小时。
（四）染色镜检：
将疑似大肠杆菌的纯培养物涂片、革兰氏染色。经染色镜检证明，为革兰氏阴性短杆菌者，应继续做生化试验。
（五）生化试验：
1．乳糖发酵试验
将上述纯培养物接种于乳糖发酵管，置37°培养24—48小时，凡大肠杆菌，可发酵乳糖产酸产气，或产酸不产气时，加用酸性复红指示剂的应显红色；加ＢＴＢ指示剂时显蓝色。产气者，倒管内有气泡。
2．ＩＭＶｉＣ试验：
①靛基质试验：将纯培养物接种于蛋白胨水，置37°培养24—48小时，沿管壁加柯凡克氏试剂0．3—0．5毫升，轻微摇动，静置片刻，观察液面。阳性反应，液面呈玫瑰红色；阴性反应液面呈试剂本色。
②甲基红试验：将纯培养的菌苔接种于磷酸盐葡萄糖蛋白胨水培养基内，置37℃培养24—48小时，加入甲基红试剂数滴，观察结果。阳性反应呈鲜红色或桔红色；阴性反应呈黄色。
③Ｖ—Ｐ试验：将纯培养物接种于磷酸盐葡萄糖蛋白胨水培养基内，置37°培养48小时，按培立脱法先加6％ａ－萘酚无水乙醇溶液1毫升，再加40％的氢氧化钾溶液0．4毫升，轻摇后观察结果。阳性反应，加入试剂后，应在15分钟内显红色、深红色。如不明显，可延长至
4小时。
④枸橼酸盐利用试验：将纯培养的菌苔接种于西蒙氏枸橼酸盐琼脂斜面，37°培养24小时，观察结果。阳性反应，斜面有菌苔生长，培养基由绿色变为蓝色。阴性反应斜面无菌苔生长，培养基仍为绿色。当见有微量或痕迹生长的可疑现象时，应将待检菌株分离，纯化后再行试验。
（六）供试品检验报告：
供试品增菌后，在麦康凯或伊红美兰琼脂平板上分离的疑似大肠杆菌，经证实为革兰氏阴性短杆菌，乳糖发酵试验阳性，ＩＭＶｉＣ试验呈＋＋－－或－＋－－反应者，应即报告供试品检出大肠杆菌。〔注〕
大肠杆菌及其他致病菌检查按一次检出结果为准，不再抽样复试。
〔注〕关于大肠杆菌的ＩＭＶｉＣ反应的说明
大肠杆菌ＩＭＶｉＣ试验的模式反应，在一般情况下应为“＋＋－－”或将“－＋－－”也包括在内，共代表了绝大多数大肠杆菌（占99％）的实际反应结果，因而受到了国际上的广泛承认，并将其列为大肠杆菌的常规鉴别ＩＭＶｉＣ反应公式。但个别大肠杆菌的ＩＭＶｉＣ反应，
也可能出现“＋－－－”和“＋＋－＋”等等异常现象。由于这种异常反应出现的频率极少，没有普遍性的代表意义，因而在分类鉴别和统计学上，可以忽略不计。
四、沙门氏菌检验法
沙门氏菌主要寄生在人体、哺乳动物和家禽的肠道内，可随同粪便的排泄污染水源，食品与药品。沙门氏菌的种类繁多，有些对人有致病力，如伤寒沙门菌和副伤寒沙门氏菌；有些对动物有致病力，如鸭沙门氏菌和雏沙门氏菌；尚有一些对人和动物皆有致病力，如肠炎沙门氏菌、鼠伤
寒沙门氏菌和猪霍乱沙门氏菌等。它们能引起人类伤寒症、急性胃肠炎和败血症等。
带有这些细菌的人与动物常可直接或间接地污染药品的生产环境、工具设备和原料辅料，以及半成品和成品等。特别是用动物脏器制成的药品，污染机率较高，影响患者用药安全，并有可能通过药品的流通而传播。故将沙门氏菌，应列为某些药品的必检项目。
沙门氏菌检验程序。
沙门氏菌检验程序图解
－－－－－
｜供试品｜
－－－－－
↓稀释
－－－－－
｜供试液｜
－－－－－
↓
－－－－－－－－－－
｜胆盐乳糖增菌培养｜
－－－－－－－－－－
37°↓18—24小时
－－－－－－－－－－
｜ＳＳ与ＥＭＢ平板｜
－－－－－－－－－－
37°↓18—24小时
－－－－－－－
｜三糖铁琼脂｜
－－－－－－－
37°↓18—24小时
－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－
｜ ｜ ｜ ｜
－－－ －－－ －－－ －－－－－－－－－－－－－
｜动｜ ｜镜｜ ｜凝｜ ｜ 一般生化反应 ｜
｜ ｜ ｜ ｜ ｜集｜ ｜－－－－－－－－－－－｜
｜ ｜ ｜ ｜ ｜试｜ ｜葡乳麦甘蔗靛硫尿赖脱氰｜
｜力｜ ｜检｜ ｜验｜ ｜萄 芽露 基化素氨羧化｜
｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜糖糖糖醇糖质氢酶酸酶钾｜
－－－ －－－ －－－ －－－－－－－－－－－－－
｜ ｜ ｜ ｜
－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－
↓
－－－－－
｜报 告｜
－－－－－
（一）增菌培养：
取1∶10供试品稀释液10毫升，接种于备妥的100毫升胆盐乳糖增菌液内。置37°培养18—24小时，进行增菌。
（二）分离培养：
取上述增菌培养物，划线接种于ＳＳ琼脂和ＥＭＢ琼脂平板各一个（划线时，适当增加ＳＳ琼脂平板的涂抹量2—3环，可提高阳检率），置37°培养18—24小时。凡沙门氏菌，在ＳＳ和ＥＭＢ琼脂平板上，菌落一般无色透明或半透明，圆形，周边整齐，表面光滑湿润，在ＳＳ
琼脂平板上中心有时呈黑褐色。如有上述疑似菌落，应选取2—3个分别进行纯培养，按下列方法鉴别。
（三）初步鉴别：
将上述纯培养物分别穿刺并划线接种三糖铁（ＴＳＩ）琼脂，置37°培养18—24小时。凡在ＴＳＩ琼脂中不分解乳糖及蔗糖（即上部斜面呈碱性，不变色），下层底部分解葡萄糖呈酸性变黄色（有气泡或无气泡），有动力或无动力，以及产生或不产生黑褐色的硫化氢反应，并经
涂片染色镜检为革兰氏阴性杆菌，都应继续做生化试验和血清学检查。
（四）生化试验：
取上述疑似菌落的纯培养物、分别接种至葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇和蔗糖等发酵管培养基，并接种蛋白胨水和尿素培养基，经37°培养2—5天，观察结果。沙门氏菌一般生化反应和动力检查，绝大数应为、葡萄糖＋，乳糖－，麦芽糖＋，甘露醇＋，蔗糖－，靛基质－，硫化
氢＋，尿素酶－，动力＋。当一般生化试验符合时，应做赖氨酸脱羧酶及氰化钾试验。沙门氏菌赖氨酸脱羧酶试验＋，氰化钾－。系统生化试验，详见表2：肠杆菌科各菌属的生化特性鉴别表。
（五）动力试验：
取上述纯培养物穿刺接种半固体培养基，于37°培养24小时后，观察动力表现。无动力表现的培养物，应在室温（25°左右）保留2—3天后，再观察。
（六）血清学检查：
取上述疑似菌落的ＴＳＩ琼脂培养物少许，与沙门氏菌Ａ—Ｆ多价Ｏ血清作玻片凝集试验，并以生理盐水作对照试验。若凝集试验为阴性反应时，应将菌苔制成浓菌液在100℃水浴中保温30分钟后再进行Ａ—Ｆ多价Ｏ血清凝集试验。将反应结果，结合生化试验，判定之。
（七）供试品检验报告：
凡菌落形态与初步鉴定符合下列情况分别报告如下：
－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－
血 清 ｜ Ａ—Ｆ多 ｜生理｜ 一般｜
｜ 价Ｏ血清 ｜ ｜ ｜
－－－－－－－－－－－｜－－－－－－－－－－｜盐水｜ 生化｜ 报告
待 检 菌 ｜ ｜ 100°｜ ｜ ｜
－－－－－－－－－－－｜ 菌苔 ｜ 03′ ｜对照｜ 反应｜
顺 序 ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
－－－－－－－－－－－｜－－－－｜－－－－－｜－－｜－－－｜－－－－－－－－－－－
1 ｜ ＋ ｜ ｜ － ｜ 符合｜检出沙门氏菌
｜ ｜ ｜ ｜ ｜
2 ｜ ＋ ｜ ｜ － ｜不符合｜转有关部门进一步检定
｜ ｜ ｜ ｜ ｜
3 ｜ － ｜ ＋ ｜ － ｜ 符合｜检出沙门氏菌
｜ ｜ ｜ ｜ ｜
4 ｜ － ｜ ＋ ｜－ ｜不符合｜转有关部门进一步检定
｜ ｜ ｜ ｜ ｜
5 ｜ － ｜ － ｜－ ｜不符合｜未检出沙门氏菌
｜ ｜ ｜ ｜ ｜
6 ｜ － ｜ － ｜－ ｜ 符合｜转有关部门进一步检定
－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－
五、绿脓杆菌检验法
假单胞菌属的绿脓杆菌对人类有致病力，同药品卫生有关。特别在大面积的烧伤、烫伤患者，眼科疾病和其他外伤方面，常因感染绿脓菌后病情加重，造成患者伤处化脓，并可引起菌血症等，眼角膜溃疡甚至失明，损害病人健康。因此一般眼科制剂和外伤用药，规定不得检出绿脓杆菌
。
绿脓杆菌检验程序（见次页）。
绿脓杆菌和其他革兰氏阴性杆菌的主要特性鉴别见表3。
（一）增菌培养：
取供试液10毫升，接种于备妥的100毫升胆盐乳糖培养液内，置37°培养18—24小时。
增菌后，如有绿脓杆菌生长，液体表面多有一层薄菌膜，培养液常呈黄绿色或蓝绿色。
一般滴眼剂如为抗生素或有抑菌作用的供试品，取样4毫升，用滤膜法处理后，将薄膜分成4片，分别接入100毫升的胆盐乳糖增菌液两瓶中，其中一瓶接阳性菌作对照。置37°培养18—24小时。
（二）分离培养：
取上述增菌培养物（应尽量从培养液的薄菌膜部位挑取），划线在十六烷三甲基溴化铵或明胶十六烷三甲基溴化铵琼脂平板上，置37°培养18—24小时。
凡绿脓杆菌在十六烷三甲基溴化铵平板上或在明胶十六烷三甲基溴化铵平板上其菌落扁平无定形周边扩散或略有蔓延，表面湿润，菌落呈灰白色，菌落周围培养基常扩散有水溶性蓝绿色色素，在含有明胶平板上除上述形态外，菌落周围呈现明胶液化环。
挑取疑似绿脓杆菌菌落2—3个进行纯培养。
（三）染色镜检：
挑取疑似菌落纯培养物、涂片、革兰氏染色，经镜检为阴性杆菌者，应进行氧化酶试验。
（四）生化试验
1．氧化酶试验
取一小块白色洁净的滤纸片放在平皿内，用无菌玻璃棒挑取绿脓杆菌疑似菌落的纯培养物，涂在滤纸片上，然后滴加一滴新鲜配制的1％二甲基对苯二胺盐酸盐试液于培养物上，在30秒钟之内，纸片上的待检培养物出现粉红色，并逐渐变为紫红色时，即为氧化酶试验阳性。若培养物
不变色，氧化酶试验阴性，供试品可按未检出绿脓杆菌报告。
2．绿脓菌素试验：
挑取纯培养物分别接种在专供测定绿脓菌素用的ＰＤＰ琼脂斜面培养基上，置37°培养24小时后，在试管内加氯仿3—5毫升，充分振摇，将琼脂斜面培养物中的待检色素提取在氯仿液里。待氯仿提取液呈蓝绿色时，用吸管将其移到另一试管中，并在该液中加1Ｎ的盐酸1毫升左
右，振摇后，静置片刻，如果在上层的盐酸液内出现粉红色时，即为阳性，表明被检菌的培养物中有绿脓菌素存在。如阴性，应继续将纯培养物接种在ＰＤＰ琼脂斜面上，37°培养2—3天后，检查有无绿脓杆菌素产生。
3．硝酸盐还原产气试验：
绿脓杆菌检验程序图解
－－－－－
｜供试品｜
－－－－－
↓
－－－－－
｜供试液｜
－－－－－
↓
－－－－－－－－
｜胆盐乳糖增菌｜
－－－－－－－－
37° ↓18—24小时
－－－－－－－－－－－－－－－
｜十六烷三甲基溴化铵平板或明｜
｜胶十六烷三甲基溴化铵平板 ｜
－－－－－－－－－－－－－－－
37° ↓18—24小时
－－－－－
｜纯培养｜
－－－－－
↓
－－－－－－－
｜染色、镜检｜
－－－－－－－
↓
－－－－－－－
｜氧化酶试验｜
－－－－－－－
｜
（－） －－－－－－－－－－－－－－－－－－－－ （＋）
↓ ↓
阴 性 －－－－－－－－
↓ ｜绿脓菌素试验｜
－－－－－ －－－－－－－－
｜报 告｜ （一） ↓ （＋）
－－－－－ －－－－－－－－－－－－
↓ ↓
－－－－－－－－－－－－－－－－－ －－－－－
↓ ↓ ↓ ｜报 告｜
－－－－－
－－－－－－ －－－－－－－ －－－－－－－－－
｜明胶液化｜ ｜硝酸盐还原｜ ｜42°生长试验｜
｜ 试验 ｜ ｜产气试验 ｜ ｜ ｜
－－－－－－ －－－－－－－ －－－－－－－－－
｜ ｜ ｜
－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－
↓
－－－－－
｜报 告｜
－－－－－
表3 绿脓杆菌和其他革兰氏阴性杆菌的主要特性鉴别表
－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－
｜分离 ｜ 色素 ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
鉴 别 培 养 ｜－－－｜－－－－－－－－－－－｜ ｜氧｜氧｜ ｜精解｜硝 产｜ ｜42
｜ ｜ ｜ ｜ ｜鞭 ｜化｜ ｜ 乙 ｜氨 ｜酸 ｜液｜生
－－－－－－－－－－－｜十六烷｜ 绿 ｜ 萤 ｜ 其 ｜毛 ｜葡｜化｜ 酰 ｜酸 ｜盐 ｜化｜长
｜三甲基｜ 脓 ｜ 光 ｜ 他 ｜染 ｜萄｜ ｜ 氨 ｜双 ｜还 ｜明｜试
菌 种 ｜溴化铵｜ 菌 ｜ 色 ｜ 色 ｜色 ｜糖｜酶｜ 酶 ｜水酶｜原 气｜胶｜验
｜琼脂 ｜ 素 ｜ 素 ｜ 素 ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
－－－－－－－－－－－｜－－－｜－－－｜－－－｜－－－｜－－｜－｜－｜－－－｜－－｜－－－｜－｜－－－
绿脓杆菌 ｜ ＋ ｜＋／－｜＋／ ｜＋／－｜端极｜＋｜＋｜ ＋ ｜＋ ｜ ＋ ｜＋｜＋
(P. aeruginosa) ｜ ｜ ｜ ｜ ｜单毛｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
－－－－－－－－－－－｜－－－｜－－－｜－－－｜－－－｜－－｜－｜－｜－－－｜－－｜－－－｜－｜－－－
萤光假单胞菌 ｜－／＋｜ － ｜＋／－｜ － ｜端极｜＋｜＋｜－／＋｜＋ ｜－／＋｜＋｜－
(P. fluorescens) ｜ ｜ ｜ ｜ ｜多毛｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
－－－－－－－－－－－｜－－－｜－－－｜－－－｜－－－｜－－｜－｜－｜－－－｜－－｜－－－｜－｜－－－
恶臭假单胞菌 ｜－／＋｜ － ｜＋／－｜ － ｜” ｜＋｜＋｜－／＋｜＋ ｜ － ｜－｜－
(P. putida) ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
－－－－－－－－－－－｜－－－｜－－－｜－－－｜－－－｜－－｜－｜－｜－－－｜－－｜－－－｜－｜－－－
洋葱假单胞菌 ｜＋／－｜ － ｜ － ｜－／＋｜” ｜＋｜＋｜ ＋ ｜－ ｜ － ｜＋｜＋／－
(P. cepacia) ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ ｜
－－－－－－－－－－－｜－－－｜－－－｜－－－｜－－－｜－－｜－｜－｜－－－｜－－｜－－－｜－｜－－－
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